乙醇酸氧化酶（GO）提取液的實驗方法及注意事項
更新時間：2019-05-06 點擊次數(shù)：2231次 乙醇酸氧化酶(Glycolate oxidase，GO)是乙醇酸循環(huán)的一種酶，在乙醇酸代謝循環(huán)中乙醇酸通過乙醇酸氧化酶的作用而變成乙醛酸。光合作用與呼吸作用是植物代謝的兩大核心內(nèi)容，前者是物質(zhì)合成與能量儲存過程，屬于同化作用，為包括人來在內(nèi)的幾乎所有生物的生存提供物質(zhì)來源和能量來源；后者是物質(zhì)分解與能量釋放過程，屬于異化作用，為生命提供能量。通過測定樣品中乙醇酸氧化酶活性，了解植物的光合和呼吸代謝的基本方法。
乙醇酸氧化酶(GO)提取液主要用于提取植物組織或果實中乙醇酸氧化酶。該試盒僅用于科研領(lǐng)域，不宜用于診斷或其他用途。
操作步驟(僅供參考)：
1、取新鮮植物葉片，清洗干凈，吸水紙吸干，加入預(yù)冷的GO Lysis buffer，冰浴情況下充分勻漿或研磨，經(jīng)紗布或濾紙過濾，將濾液置于離心管或試管。
2、離心，取上清液置于新的離心管或試管，調(diào)節(jié)pH 值,離心，取上清液。
3、不斷混勻，離心，取上清液。
4、不斷混勻，離心，棄上清液，留取沉淀即為乙醇酸氧化酶粗制品。
5、加入適量的GO懸浮液溶解沉淀，使其體積為開始提取液體積的1/10，即為乙醇酸氧化酶粗提液，保存待用?？煽紤]采用BCA蛋白定量法等檢測乙醇酸氧化酶粗提液中蛋白質(zhì)的濃度。
注意事項：
1、實驗材料應(yīng)盡量新鮮，如取材后不立即使用，應(yīng)存于-20~-80℃。
2、如果沒有分光光度計，也可以使用普通的酶標(biāo)儀測定，但應(yīng)考慮酶標(biāo)儀的大檢測體
積。
3、所測樣本的濃度過高，應(yīng)用乙醇酸氧化酶(GO)提取液稀釋樣品后重新測定。
4、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期：12個月有效
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