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中性轉(zhuǎn)化酶(Neutral invertase, NI)的檢測原理!

更新時間:2021-09-06   點(diǎn)擊次數(shù):781次

中性轉(zhuǎn)化酶(Neutral invertase, NI)的檢測原理!

蔗糖轉(zhuǎn)化酶(Invertase,Ivr)催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖,是高等植物蔗糖代謝關(guān)鍵酶之一。根據(jù)適 pH,將高等植物Ivr分為酸性轉(zhuǎn)化酶(AI)和中性轉(zhuǎn)化酶(NI)兩種類型。NI主要存在于細(xì)胞質(zhì)中,負(fù)責(zé)分解細(xì)胞質(zhì)中蔗糖為果糖和葡萄糖。

檢測原理:

NI催化蔗糖分解產(chǎn)生還原糖,進(jìn)一步與3,5-二硝基水楊酸反應(yīng),生成棕紅色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范圍內(nèi)510nm光吸收值與還原糖生成量成正比。通過光吸收增加速率來計算NI活性

實驗所需設(shè)備:

可見分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存;

試劑一:液體20mL×1瓶,4℃保存;

試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存;臨用前加入20mL試劑一充分溶解備用;

試劑三:液體15mL×1瓶,4℃保存;

生物試劑的使用常識:

(1)試劑切忌與手接觸(有些試劑有強(qiáng)腐蝕性、等特性)。

(2)要用潔凈的藥勺,量筒或滴管取用試劑,絕對不允許用同一種工具同時連續(xù)取用多種試劑。取完一種試劑后,應(yīng)將工具洗凈(藥勺要擦干)后,才可取用另一種試劑。

(3)試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊,不可放錯瓶蓋和滴管,絕不允許張冠李戴,用完后請及時將瓶放回原處,以免遺忘,帶來不便。

(4)已取出的試劑不能再放回原試劑瓶內(nèi)(怕產(chǎn)生原試劑的再次污染)。

本產(chǎn)品僅供科研實驗用,不做其它用途!現(xiàn)貨供應(yīng),歡迎廣大用戶前來咨詢!








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