碘[125I]人促卵泡生成 激素放射免疫分析藥盒說明書
碘[125I]人促卵泡生成激素放射免疫分析藥盒說明書 【藥品名稱】
通用名：碘[125I]人促卵泡生成激素放射免疫分析藥盒
英文名：Iodine [125I] Human Follicle Stimulating Hormone Radioimmunoassay Kit
漢語拼音：Dian[125I] Renculuanpaoshengchengjisu Fangshemianyifenxi Yaohe
【成分】
規(guī)格 成分 | 100管 | 50管 | 制品 狀態(tài) | 1）FSH標(biāo)準(zhǔn)品（S0-S6） | 7瓶（S0：5ml，其它各1ml） | 7瓶（S0：5ml，其它各1ml） | 液 體 | 2）125I-FSH（紅色） | 1瓶 | 1瓶 | 凍干品 | 3）兔抗-FSH抗體（藍(lán)色） | 1瓶 | 1瓶 | 凍干品 | 4）驢抗兔免疫分離劑 | 1瓶（50ml） | 1瓶（25ml） | 液 體 | 5）FSH質(zhì)控血清 | 2瓶（每瓶1ml） | 2瓶（每瓶1ml） | 液 體 |
【性狀】液體組分(免疫分離劑除外)應(yīng)澄清，無沉淀或絮狀物；凍干組分應(yīng)呈疏松狀，復(fù)溶后應(yīng)無沉淀或絮狀物。 【放射性核素半衰期】本品所用核素為碘[125I]，其物理半衰期(T1/2)為60天。 【意義】 促卵泡生成激素（Follicle Stimulating Hormone, FSH）是由垂體前葉嗜堿性細(xì)胞分泌的一種糖蛋白激素，其蛋白部分由204個(gè)氨基酸構(gòu)成α和β兩個(gè)亞基，α亞基與LH、TSH和HCG相同，只有β亞基具有特異的結(jié)構(gòu)，兩者通過非共價(jià)鍵連接，分子量為32KD。FSH在卵泡發(fā)育過程中的作用包括：促進(jìn)內(nèi)膜細(xì)胞的分化；促進(jìn)顆粒細(xì)胞增生；促進(jìn)卵泡液分泌，使卵泡及其內(nèi)腔增大，同時(shí)伴有整個(gè)卵巢的增大。實(shí)驗(yàn)表明：卵泡發(fā)育的以上幾個(gè)階段都須有FSH的參與，而且只有當(dāng)FSH與LH共同作用時(shí)，成熟的卵泡才能分泌雌激素和孕激素。對男性來說，F(xiàn)SH的作用是促進(jìn)生精上皮細(xì)胞的發(fā)育和精子的成熟。 本藥盒用于血清中FSH含量的測定，對診斷男、女不孕癥、性功能減退、青春期延遲、性早熟、子宮內(nèi)膜異位等疾病有非常重要的意義。對作用于下丘腦-垂體-性腺軸的女性避孕藥的藥理研究也有很大價(jià)值。 【測定原理】 應(yīng)用均相競爭原理，標(biāo)準(zhǔn)或樣品中的FSH和加入的125I-FSH共同與一定量的特異性抗體產(chǎn)生競爭性免疫結(jié)合反應(yīng)。125I-FSH與抗體的結(jié)合量與標(biāo)準(zhǔn)或樣品中FSH的含量呈一定的函數(shù)關(guān)系。用免疫分離試劑（PR）將結(jié)合部分（B）與游離部分（F）分離后，測定結(jié)合部分的放射性強(qiáng)度，并計(jì)算相應(yīng)結(jié)合率B/B0。用已知FSH標(biāo)準(zhǔn)含量與對應(yīng)結(jié)合率作圖，即得標(biāo)準(zhǔn)曲線。從標(biāo)準(zhǔn)抑制曲線上查知對應(yīng)結(jié)合率的待測樣品中FSH的含量。 【適用儀器】適用于各類γ-放射免疫分析儀。 【樣本要求】 取靜脈血分離血清，待測；如不立即測量，可將樣本密封后，置于2~8℃或-20℃儲存?zhèn)錅y，2~8℃保存不應(yīng)超過48小時(shí)，-20℃保存不超過1個(gè)月。 【用法用量】 1 試劑配制、使用方法和保存 - FSH標(biāo)準(zhǔn)品：液體，直接使用，標(biāo)準(zhǔn)濃度分別為0、2.5、5、10、25、50、100mIU/ml。標(biāo)準(zhǔn)2~8℃保存，42天內(nèi)穩(wěn)定；未開蓋的標(biāo)準(zhǔn)品2~8℃保存，標(biāo)識的有效期內(nèi)穩(wěn)定。
- 125I-FSH：凍干品，用蒸餾水溶解，100管10ml溶解，50管5ml溶解。如一次加樣超過100管，兩瓶混合后使用。標(biāo)記物放射性不大于111KBq(3μCi)，2~8℃保存，標(biāo)識的有效期內(nèi)穩(wěn)定。
- 兔抗-FSH抗體：凍干品，用蒸餾水溶解，溶解方法見封底。同次實(shí)驗(yàn)抗體加樣超過100管時(shí)，兩瓶溶解后混合使用?？贵w溶解后2~8℃保存可穩(wěn)定42天，凍干品-20℃保存有效期內(nèi)穩(wěn)定。
- 驢抗兔免疫分離劑：液體，直接使用，但加樣前必須搖勻！2~8℃保存，有效期內(nèi)穩(wěn)定。開封后zui多穩(wěn)定45天。若加樣超過100管，兩瓶混合后搖勻。
- FSH質(zhì)控血清：使用方法，保存條件，有效期及附值，詳見質(zhì)控血清使用說明書。
2測定步驟 取圓底聚苯乙烯試管若干，用記號筆或特殊鉛筆編號NSB、S0-S6和待測樣品管等，然后用微量加樣器按下表加樣。加樣前所有試劑（尤其分離劑！）包括待測樣品要搖勻，并且平衡到室溫。
操作程序表 單位：μl 管別 試劑 | NSB管 | S0~S6管 | 待測樣品管 | 質(zhì)控管 | FSH標(biāo)準(zhǔn)品 | 300(S0) | 200 | — | — | 待測樣品 | — | — | 200 | — | FSH質(zhì)控血清 | — | — | — | 200 | 125I-FSH | 100 | 100 | 100 | 100 | 兔抗-FSH抗體 | — | 100 | 100 | 100 | 混勻，任取三管測總T，36-38℃溫育16~24小時(shí) | 驢抗兔免疫分離劑 | 500 | 500 | 500 | 500 | 充分搖勻后，室溫放置15分鐘，3500轉(zhuǎn)/分鐘離心15分鐘，吸棄上清，測各沉淀管的放射性計(jì)數(shù)(cpm)。 |
3數(shù)據(jù)處理 - 聯(lián)機(jī)處理: 由電腦自動處理得出結(jié)果。注意放射免疫方法和免疫放射方法由于原理不同，處理軟件也不一樣，用戶一定要使用適合的處理軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。在此建議用戶使用log-logit或四參數(shù)數(shù)據(jù)處理模式。
- 手工作圖或計(jì)算器處理:
- 百分結(jié)合率計(jì)算：設(shè)S0管計(jì)數(shù)為B0，各標(biāo)準(zhǔn)管或樣品管計(jì)數(shù)為B，非特異管計(jì)數(shù)為NSB，則百分結(jié)合率計(jì)算公式為
B/ B0=(B－NSB)/( B0－NSB)×100% 3.2.2 logit計(jì)算：各標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)或樣品管的logit值計(jì)算公式為 logit=ln[(B/ B0)/(1－B/ B0)] 3.2.3 手工作圖：以標(biāo)準(zhǔn)濃度取log值為橫坐標(biāo)，對應(yīng)的logit值為縱坐標(biāo)在普通坐標(biāo)紙上或以標(biāo)準(zhǔn)濃度為橫坐標(biāo)，對應(yīng)的B/B0為縱坐標(biāo)在log-logit坐標(biāo)紙上畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線（理想化時(shí)是一條直線）。根據(jù)待測樣品的B/B0可以從坐標(biāo)紙上查出樣品的濃度值。注意：如果使用普通坐標(biāo)紙，查出的數(shù)值應(yīng)取反對數(shù)才是zui后的濃度值。 3.2.4計(jì)算器處理：使用有線性擬合功能的計(jì)算器，可以比較方便地計(jì)算出樣品濃度值，具體操作方法請查閱計(jì)算器的使用說明書。 3.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線舉例（僅供參考，不得用于實(shí)際計(jì)算）。濃度單位mIU/ml 項(xiàng)目 | NSB | 0 | 2.5 | 5 | 10 | 25 | 50 | 100 | 百分結(jié)合率(%) | B/T | B/B0 | 2.2 | 45 | 84.8 | 77.7 | 62.5 | 36.4 | 21.9 | 11.4 | Log-logit數(shù)據(jù)處理模式主要曲線參數(shù) | A=2.82 B=-2.41 R=-0.9995 ED75=5.21 ED50＝14.8 ED25=42.3 |
【參考正常值】 正常人血清參考值： 男性：2.0—12 mIU /ml(n=60) 女性：2.5—15 mIU/ml(n=98) 濾泡早期：3.5—10.0 mIU /ml 黃體期：3.0—9.0 mIU /ml 絕經(jīng)期：14—120 mIU /ml(n=17) 由于地區(qū)及使用儀器不同，所測的正常值會存在一定的差異，所以本說明書提供的正常值僅作參考。各實(shí)驗(yàn)室能建立符合本實(shí)驗(yàn)室要求的正常值范圍。 【產(chǎn)品性能指標(biāo)】 - 標(biāo)準(zhǔn)范圍：2.5—100mIU/ml
- 靈敏度：<1.0mIU/ml
- 精密度：批內(nèi)變異系數(shù)（CV）<10%；批間變異系數(shù)（CV）<15%。
- 使用期限：見產(chǎn)品外包裝。
【禁忌】本品僅供體外診斷用!
【注意事項(xiàng)】 - 收到試劑盒后，盡快存放在2~8℃。
- 實(shí)驗(yàn)前全部試劑應(yīng)放置室溫下平衡。
- 吸棄上清液時(shí)，注意不得損失沉淀物，否則將明顯影響測定結(jié)果。
- 不同試劑盒或不同月份的同種藥盒的組分不得混用。
- 藥盒請?jiān)谟行趦?nèi)使用。
- 標(biāo)本均應(yīng)視為有潛在傳染性，請按傳染病實(shí)驗(yàn)室規(guī)程操作。
- 使用本藥盒應(yīng)注意放射防護(hù)，放射性廢棄物須按放射防護(hù)條例規(guī)定處理。
- 使用本品的操作人員應(yīng)經(jīng)過專業(yè)技術(shù)培訓(xùn)。
【孕婦及哺乳期婦女用藥】由于本品僅供體外診斷用，孕婦及哺乳期婦女不需接觸本品，所以對其健康無損害。
【兒童用藥】由于本品僅供體外診斷用，兒童不需接觸本品，所以對其健康無損害。 【貯藏】2～8℃保存。 【有效期】1個(gè)月。 【執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)】國家食品藥品監(jiān)督管理局《國家藥品標(biāo)準(zhǔn)》，國家藥典委員會 編 2005年5月，WS1-(R-64)-2004Z。 抗體溶解方法： 兔抗-FSH抗體：用蒸餾水溶解， 100管產(chǎn)品每瓶抗體加 ml，50管產(chǎn)品抗體每瓶加 ml（如不填寫，50管藥盒用5ml溶解，100管藥盒用10ml溶解，若為液體抗體請直接使用）。 【批準(zhǔn)文號】國藥準(zhǔn)字S10950154
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