上海信帆生物科技有限公司：TNF-a ELISA試劑盒產(chǎn)品介紹
更新時間：2015-06-16 點擊次數(shù)：1099次人TNF-α前體由233個氨基酸組成（26 kDa），其中包含由76個氨基酸殘基組成的信號肽，在TNF轉(zhuǎn)化酶TACE的作用下，切除信號肽，形成成熟的157個氨基酸殘基的TNF-α（17 kDa）。由于沒有蛋氨酸殘基，故不存在糖基化位點，其中第69位和101位兩個半胱氨酸形成分子內(nèi)二硫鍵。人類 TNF-α與小鼠 TNF-α有79%氨基酸組成同源性，TNF-α的生物學(xué)作用似無明顯的種屬特異性。zui近有人報道通過基因工程技術(shù)表達了N端少2個氨基酸（Val、Arg）的155氨基酸人TNF-α，具有更好的生物學(xué)活性和抗腫瘤效應(yīng)。此外，還有用基因工程方法，將TNF-α分子氨基端7個氨基酸殘基缺失，再將8Pro、9Ser和10Asp改為8Arg、9Lys和10Arg，或者再同時將157Leu改為157Phe，改構(gòu)后的TNF-α比天然TNF體外殺傷L929細胞的活性增加1000倍左右，在體內(nèi)腫瘤出血壞死效應(yīng)也明顯增加。TNF-α和β發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)的天然形式是同源的三聚體。
腫瘤壞死因子(TNF)是一種具有廣泛生物學(xué)活性的細胞因子，主要由激活的單核-巨噬細胞所分泌，參與機體的免疫調(diào)節(jié)與炎癥反應(yīng)，也是某些感染性疾病和肝臟損傷的致病因素。正常人體液中的TNF水平一般在100pg/ml以下，當(dāng)患有某些疾病時， TNF水平可有不同程度增高。因此，檢測患者體液中的TNF水平，具有一定的意義。
上海信帆科技有限公司試劑盒采用雙抗夾心酶聯(lián)免疫檢測法測定人血漿或血清中的TNF，用純化的人腫瘤壞死因子α（TNF-α）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入腫瘤壞死因子α（TNF-α），再與HRP標(biāo)記的腫瘤壞死因子α（TNF-α）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的腫瘤壞死因子α（TNF-α）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準曲線計算樣品中人腫瘤壞死因子α（TNF-α）濃度。
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