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大鼠纖維連接蛋白(FN)elisa試劑盒實驗原理

更新時間:2017-04-21   點擊次數:856次

大鼠纖維連接蛋白(FN)elisa試劑盒基本信息簡介

纖維粘連蛋白(fibronectin,FN),又稱纖粘蛋白,屬非膠原糖蛋白的一種, 是一種冷不溶球蛋白,廣泛存在于動物界, 包括海綿、海膽及哺乳動物類。在脊椎動物中, 纖粘連蛋白以可溶的形式存在于血漿和各種體液中,稱為血漿纖維粘連蛋白;以不溶的纖維存在于細胞外基質、細胞之間及某些細胞表面, 稱為細胞粘連蛋白。

FN是高相對分子質量的粘附性的糖蛋白, 含糖約5%。FN由兩個亞基組成的二聚體,每個亞基的相對分子質量約250kDa, 各亞基在C末端形成兩個二硫鍵交聯。血漿FN是二聚體, 由兩條相似的A鏈和B鏈組成, 整個分子成V形。細胞FN是多聚體,其不同來源的FN亞基結構相似, 但并不相同。不同的亞單位均為同一基因的表達產物, 只是轉錄后在RNA的剪接上有所不同,因而產生不同的mRNA。另外, 在翻譯后的修飾上也有差異,FN的每個亞單位的蛋白組成若干個球形結構域, 各結構域之間由對胰蛋白酶敏感的肽鏈連接,因此可通過胰蛋白酶的水解作用分離這些結構域研究它們的功能。每個FN亞基上有與膠原、細胞表面受體、血纖蛋白和硫酸蛋白多糖高親和結合的位點。

纖維連接蛋白(英文縮寫FN)是1948年國外開始研究發(fā)現的一種高分子糖蛋白,具有多種生物學功能。FN廣泛存在于動物組織和組織液中,是一種大分子糖蛋白,分子量約為450KD,具有多種生物活性。大量國內外的研究結果證明,FN分子在進化過程中保守性很強,各種動物體液中的FN具有非常相近的結構、性質和生物學功能,因而不同來源的FN可以相互替代使用。

我國對FN的應用研究起步較晚,國內纖維連接蛋白(FN)主要從國外進口,我國的鄭州德福恩生物技術有限公司對纖維連接蛋白(FN)進行了多年研究,現已取得了纖維連接蛋白(FN)方面的多項國家發(fā)明。

大鼠纖維連接蛋白(FN)功能

作為生化試劑,為細胞培養(yǎng)及生物工程的工業(yè)化應用提供基礎。FN的很多功能中,zui基本zui重要的一項是促進細胞的黏連生長,而細胞的黏連是機體結構得以維持、細胞生長完成的必要條件。因此,FN是細胞培養(yǎng)基的重要成分之一。鄭州德福恩生物技術有限公司與中國醫(yī)學科學院共同應用豬血漿FN研究結果表明:FN作為細胞培養(yǎng)的基質,可以使多種細胞的貼壁率達到90%以上(對照組為10%),細胞形態(tài)結構良好,細胞的代謝率增強,DNA、RNA及蛋白質合成速度提高約5倍,細胞的集落率升高幾倍,原代培養(yǎng)的成活率明顯提高,細胞生長時間縮短,這對建立人體疾病的體外模型是非常有益的。研究還證明,FN能提高細胞的融合率,縮短融合周期,可應用于許多科研中,如應用于細胞雜交瘤技術等。將FN涂到微球載體上作為細胞大量生物試劑的介質,可以節(jié)省空間,節(jié)省原材料,成為應用培養(yǎng)細胞技術來生物試劑新藥品的基礎物質。細胞培養(yǎng)技術是當今生物學研究中經常使用的方法之一,也是生物工程*的手段之一。FN產品的開發(fā),將為細胞培養(yǎng)的廣泛應用及生物工程的應用和發(fā)展起到積極的推動作用。FN作為生化試劑的使用量將與日俱增,市場潛力很大。FN生化試劑主要由美國Sigma公司生物試劑(人、牛、鼠血漿FN等),我國應用還主要依賴進口。所以,國內開發(fā)FN生化試劑是當務之急(鄭州德福恩生物技術有限公司已開發(fā)出FN生化試劑,并已獲得相關國家)。

大鼠纖維連接蛋白(FN)elisa試劑盒實驗原理

①使抗原或抗體結合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。

②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測定時,把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與其他物質分開,zui后結合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質的量成一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化變?yōu)橛猩a物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據顏色反應的深淺刊物定性或定量分析。由于酶的催化頻率很高,故可地地放大反應效果,從而使測定方法達到很高的敏感度。因此,ELISA檢測是一項定位、定性和定量(敏感度可達每毫升ng~pg水平)的綜合技術。常用的酶是辣根過氧化物酶(HRP)和堿性磷酸酶(AKP)

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