蛋白質羰基含量測試盒的實驗注意點
更新時間：2023-12-11 點擊次數(shù)：154次蛋白質羰基含量測試盒的實驗注意點
（紫外比色法）
一、試劑組成和配制（50 管/24 樣，貨號 A087-1-1）：
試劑一：勻漿介質，無色透明液體，50mL×1 瓶；4℃保存；
試劑二：淺磚紅色液體，2.5mL×1 瓶；4℃避光保存；
試劑三：黃色液體，10mL×1 瓶；4℃避光保存；
試劑四：無色液體，10mL×1 瓶；4℃保存；
試劑五：無色液體，30mL×1 瓶；4℃保存；
試劑六：無色液體，70mL×1 瓶；4℃保存；
自備試劑：無水乙醇（分析純）；乙酸乙酯（分析純）；
洗滌液的配制：將無水乙醇和乙酸乙酯按照體積比 1︰1
的比例混合配置成溶液，現(xiàn)用現(xiàn)配；
二、試劑組成和配制（100 管/48 樣，貨號 A087-1-2）：
試劑一：勻漿介質,無色透明液體，100mL×1 瓶；4℃保存；
試劑二：淺磚紅色液體，5mL×1 瓶；4℃避光保存；
試劑三：黃色液體，20mL×1 瓶；4℃避光保存；
試劑四：無色液體，20mL×1 瓶；4℃保存；
試劑五：無色液體，60mL×1 瓶；4℃保存；
試劑六：無色液體，70mL×2 瓶；4℃保存；
自備試劑：無水乙醇（分析純）；乙酸乙酯（分析純）；
洗滌液的配制：將無水乙醇和乙酸乙酯按照體積比 1︰1
的比例配置成混合溶液，現(xiàn)用現(xiàn)配；
三、操作步驟：
1、血清(漿)前處理：取血清或血漿原液進行測定(同時用
雙縮脲試劑盒（本所有售,貨號 A045-1）測定血清（漿）
中總蛋白濃度)；
2、組織樣本前處理：準確稱取組織重量,按重量(g):體積
(mL)=1︰9 的比例加入 9 倍的試劑一(如準確稱取組織
重量 0.1g 加入 0.9mL 的試劑一)，冰水浴條件下機械勻
漿，2500 轉/分,離心 10min，取上清即 10%勻漿 450µL，
加入 50µL 試劑二，混勻，室溫放置 10min 后，
11000r/min
離心 10min，取上清按操作表測定(同時取部分上清用考
馬斯亮藍試劑盒（本所有售,貨號 A045-2）測定勻漿的
總蛋白濃度)；
四、測定意義：
一種檢測蛋白質羰基含量的試劑盒?？珊啽?、靈敏的
檢測各種組織器官、血清、培養(yǎng)細胞（做法同組織樣本）
和細胞器等蛋白質羰基含量。其使用不需要昂貴的設備，
樣品處理簡單，可廣泛應用于各種疾病如衰老、動脈硬化
癥，糖尿病和帕金森綜合癥、風濕性關節(jié)炎等疾病的早期
診斷，抗氧化保健食品、抗氧化藥物和化妝品等的評價，
還可以用于評價由于一些環(huán)境有害因子如輻射、化學毒物
等對機體造成的氧化損傷。
五、實驗注意點：
1、在用無水乙醇乙酸乙酯混合應用液對反應沉淀進行洗
滌時，漩渦混勻一定要劇烈充分，混勻時間不得少于一
分鐘，反應沉淀物必須洗滌至白色，如果沉淀物還有黃
色殘留，適當增加無水乙醇乙酸乙酯混合應用液的洗滌
次數(shù)，以保證洗滌充分，否則會使得測定結果偏高；
2、在進行蛋白質羰基測定時，離心的轉速不可以隨意降
低，否則會使得測定結果偏高；
3、在進行蛋白質羰基測定時，建議使用圓底的離心管進
行實驗，這樣在進行無水乙醇乙酸乙酯混合應用液洗滌
時，可以保證沉淀被充分洗滌。不建議使用尖底的離心
管進行實驗。
蛋白質羰基含量測試盒的實驗注意點
