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DPPH自由基清除率(檢測服務(wù))

更新時間:2024-06-18   點擊次數(shù):303次

DPPH自由基清除率檢測服務(wù))

 

服務(wù)介紹:

自由基清除率檢測試劑盒(比色法)又稱氮自由基清除能力檢測試劑盒或氮自由基清除率檢測試劑盒,其檢測原理是DPPH自由基是一種較穩(wěn)定的含氮自由基,含一個單電子,溶于乙醇后溶液呈紫色,在517nm下有強吸收,如果有其他物質(zhì)提供一個電子與此單電子配對,溶液會褪色,褪色程度與接受電子的量呈正比,通過吸光度下降的程度來反應(yīng)樣品的氮自由基清除能力,主要用于檢測血清、植物組織、抗氧化類食品、保健品及藥品等樣本。

 

背景介紹:

DPPH2,2-聯(lián)苯基-1-苦基肼基)自由基清除率是一種用于評估化合物或物質(zhì)抗氧化能力的指標(biāo)。DPPH是一種穩(wěn)定的有機自由基,在溶液中呈現(xiàn)深紫色,并在517 nm波長處具有最大吸收峰。當(dāng)具有抗氧化性的化合物與DPPH自由基接觸時,它們會與DPPH發(fā)生氧化還原反應(yīng),導(dǎo)致DPPH的紫色逐漸褪去,即其吸光度降低。

 

操作步驟(僅供參考):

1、準(zhǔn)備樣品:

①植物樣品:取新鮮植物樣本,清洗干凈,研缽研碎(粉碎),干燥箱烘干后過篩,稱取0.05g樣品,加入0.8ml氮自由基提取液,40℃水浴浸提30~60min,10000rpm離心10min,上清液待用,4℃保存?zhèn)溆?/span>(亦可參考相關(guān)資料提取方法提取)。

②血漿、血清和尿液樣品:血漿(用肝素或枸櫞-酸鈉抗凝,不宜使用EDTA抗凝) 45000rpm離心10min,取上清液待用;血清或尿液樣品可直接測定。

③細(xì)胞樣品:按每5×106個細(xì)胞加入0.8ml氮自由基提取液,超聲破碎(功率200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30)10000rpm離心10min,取上清液待用。

④果汁、葡萄酒等樣品:按樣品:氮自由基提取液=19的比例震蕩混勻,10000rpm離心10min,上清液待用,4℃保存?zhèn)溆谩?/span>

    高活性樣品:如果樣品中有效濃度較高,可用提取液進(jìn)行恰當(dāng)?shù)南♂尅?/span>

   2、配制維生素C溶液:將一支10mg維生素C充分溶解于1ml氮自由基提取液中

   3、配制Vc標(biāo)準(zhǔn)工作液:如需測線性關(guān)系,建議用氮自由基提取液將10mg/ml維生素C溶液稀釋至20、15、10、8、6、4、2μg/mlVc標(biāo)準(zhǔn)工作液

    4 分光光度計開機預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長517nm(500~530nm亦可),無水乙醇調(diào)零。

    5DPPH加樣:按照下表設(shè)置空白管、樣本測定管、樣本對照管、陽性對照管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,混勻,室溫避光靜置30min。

加入物(ml)

空白管

樣本測定管

樣本對照管

陽性對照管(標(biāo)準(zhǔn)管)

氮自由基提取液

0.2

上清液

0.2

0.2

Vc標(biāo)準(zhǔn)工作液

0.2

無水乙醇

0.9

0.9

1.8

0.9

DPPH溶液

0.9

0.9

0.9

6、 OD值測定:將各管溶液依次加入到比色皿中,用分光光度計檢測各管吸光度值,依次記為A0A1、A2、A3。

 

實驗結(jié)果:

全自動生化儀檢測后導(dǎo)出結(jié)果,結(jié)果由EXCEL形式發(fā)送。

 

送樣須知:

1.南京和上海地區(qū)的客戶可提供上門取樣服務(wù),提前一天聯(lián)系

2.外地客戶可郵寄樣本,樣本運輸應(yīng)符合一般的生物學(xué)要求,密封加冰袋或者干冰運輸

3.若細(xì)胞、血清、組織樣本具有潛在的傳染性或致病性,請務(wù)必提前告知

4.測試結(jié)束提供實驗報告后,樣本可以保留1個月,若需保留樣本或者回收樣本請?zhí)崆案嬷?/span>

 

備注:本公司對客戶的項目的專有技術(shù)和資料(包括實驗方案,測試結(jié)果,樣本等)負(fù)有絕對保密的責(zé)任。

僅供科研實驗用,不走其他用途!

DPPH自由基清除率(檢測服務(wù))

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