DPPH自由基清除率（檢測服務(wù)）
更新時間：2024-06-18 點擊次數(shù)：303次DPPH自由基清除率（檢測服務(wù)）
服務(wù)介紹：
自由基清除率檢測試劑盒(比色法)又稱氮自由基清除能力檢測試劑盒或氮自由基清除率檢測試劑盒，其檢測原理是DPPH自由基是一種較穩(wěn)定的含氮自由基，含一個單電子，溶于乙醇后溶液呈紫色，在517nm下有強吸收，如果有其他物質(zhì)提供一個電子與此單電子配對，溶液會褪色，褪色程度與接受電子的量呈正比，通過吸光度下降的程度來反應(yīng)樣品的氮自由基清除能力，主要用于檢測血清、植物組織、抗氧化類食品、保健品及藥品等樣本。
背景介紹：
DPPH（2,2-聯(lián)苯基-1-苦基肼基）自由基清除率是一種用于評估化合物或物質(zhì)抗氧化能力的指標(biāo)。DPPH是一種穩(wěn)定的有機自由基，在溶液中呈現(xiàn)深紫色，并在517 nm波長處具有最大吸收峰。當(dāng)具有抗氧化性的化合物與DPPH自由基接觸時，它們會與DPPH發(fā)生氧化還原反應(yīng)，導(dǎo)致DPPH的紫色逐漸褪去，即其吸光度降低。
操作步驟（僅供參考）：
1、準(zhǔn)備樣品：
①植物樣品：取新鮮植物樣本，清洗干凈，研缽研碎(粉碎)，干燥箱烘干后過篩，稱取0.05g樣品，加入0.8ml氮自由基提取液，40℃水浴浸提30~60min，10000rpm離心10min，上清液待用，4℃保存?zhèn)溆?/span>(亦可參考相關(guān)資料提取方法提取)。
②血漿、血清和尿液樣品：血漿(用肝素或枸櫞-酸鈉抗凝，不宜使用EDTA抗凝) 4℃ 5000rpm離心10min，取上清液待用；血清或尿液樣品可直接測定。
③細(xì)胞樣品：按每5×106個細(xì)胞加入0.8ml氮自由基提取液，超聲破碎(功率200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次)，10000rpm離心10min，取上清液待用。
④果汁、葡萄酒等樣品：按樣品：氮自由基提取液=1：9的比例震蕩混勻，10000rpm離心10min，上清液待用，4℃保存?zhèn)溆谩?/span>
⑤ 高活性樣品：如果樣品中有效濃度較高，可用提取液進(jìn)行恰當(dāng)?shù)南♂尅?/span>
2、配制維生素C溶液：將一支10mg維生素C充分溶解于1ml氮自由基提取液中
3、配制Vc標(biāo)準(zhǔn)工作液：如需測線性關(guān)系，建議用氮自由基提取液將10mg/ml維生素C溶液稀釋至20、15、10、8、6、4、2μg/ml的Vc標(biāo)準(zhǔn)工作液
4、 分光光度計開機預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長517nm(500~530nm亦可)，無水乙醇調(diào)零。
5、DPPH加樣：按照下表設(shè)置空白管、樣本測定管、樣本對照管、陽性對照管，溶液應(yīng)按照順序依次加入，混勻，室溫避光靜置30min。
加入物(ml) | 空白管 | 樣本測定管 | 樣本對照管 | 陽性對照管(標(biāo)準(zhǔn)管) |
氮自由基提取液 | 0.2 | — | — | — |
上清液 | — | 0.2 | 0.2 | — |
Vc標(biāo)準(zhǔn)工作液 | — | — | — | 0.2 |
無水乙醇 | 0.9 | 0.9 | 1.8 | 0.9 |
DPPH溶液 | 0.9 | 0.9 | — | 0.9 |
6、 OD值測定：將各管溶液依次加入到比色皿中，用分光光度計檢測各管吸光度值，依次記為A0、A1、A2、A3。
實驗結(jié)果：
全自動生化儀檢測后導(dǎo)出結(jié)果，結(jié)果由EXCEL形式發(fā)送。
送樣須知：
1.南京和上海地區(qū)的客戶可提供上門取樣服務(wù)，提前一天聯(lián)系
2.外地客戶可郵寄樣本，樣本運輸應(yīng)符合一般的生物學(xué)要求，密封加冰袋或者干冰運輸
3.若細(xì)胞、血清、組織樣本具有潛在的傳染性或致病性，請務(wù)必提前告知
4.測試結(jié)束提供實驗報告后，樣本可以保留1個月，若需保留樣本或者回收樣本請?zhí)崆案嬷?/span>
備注：本公司對客戶的項目的專有技術(shù)和資料（包括實驗方案，測試結(jié)果，樣本等）負(fù)有絕對保密的責(zé)任。
僅供科研實驗用，不走其他用途！
