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谷-胱甘肽(GSH)測(cè)定試劑盒 生化試劑

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谷-胱甘肽(GSH)測(cè)定試劑盒,二硫代二硝基苯甲酸與巰基化合物反應(yīng)時(shí)能產(chǎn)生一種黃色化合物,可進(jìn)行比色定量測(cè)定。

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谷-胱甘肽(GSH)測(cè)定試劑盒

(比色法)

一、測(cè)定原理:

二硫代二硝基苯甲酸與巰基化合物反應(yīng)時(shí)能產(chǎn)生一種黃色化合物,可進(jìn)行比色定量測(cè)定。

二、試劑組成與配制:(100T/96 樣)

試劑一:甲粉×1 瓶,乙液 50ml×1 瓶,4℃保存 6 個(gè)月。甲粉: 90100℃的熱雙蒸水 170ml,

充分溶解;

試劑一應(yīng)用液的配制:將已配好的甲液與乙液充分混合。此為過飽和溶液,室溫靜置冷卻后,如

有結(jié)晶,則取上清進(jìn)行實(shí)驗(yàn),室溫保存 6 個(gè)月。

試劑二:粉劑×1 瓶,用時(shí)加雙蒸水至 200ml 溶解,用我所贈(zèng)送的塑料瓶室溫保存 6 個(gè)月。

試劑三:粉劑×1 支,用時(shí)加雙蒸水至 50ml 溶解,避光 4℃保存 6 個(gè)月。

試劑四:粉劑×4 支,用時(shí)每支加雙蒸水 10ml 溶解,避光冷藏可保存 5 天。

試劑五:GSH 標(biāo)準(zhǔn)品粉劑 3.07mg×3 支,4℃保存 6 個(gè)月。

試劑六:GSH 標(biāo)準(zhǔn)品溶劑貯備液 10ml×1 瓶,4℃保存 6 個(gè)月。

GSH 標(biāo)準(zhǔn)品溶劑應(yīng)用液的配制: GSH 標(biāo)準(zhǔn)品溶劑貯備液:雙蒸水=1:9,加入 9 倍體積的雙

蒸水進(jìn)行稀釋,現(xiàn)用現(xiàn)配。

1mmol/L GSH 標(biāo)準(zhǔn)品溶液的配制:GSH 的分子量為 307,每次測(cè)定前將 3.07mg GSH 標(biāo)

準(zhǔn)品加入到 10ml GSH 標(biāo)準(zhǔn)品溶劑應(yīng)用液中,混勻,

現(xiàn)用現(xiàn)配。

20μmol/L GSH 標(biāo)準(zhǔn)品溶液的配制: 1mmol/LGSH 標(biāo)準(zhǔn)品溶液 0.2ml 加入 GSH 標(biāo)準(zhǔn)品溶

劑應(yīng)用液 9.8ml, 現(xiàn)用現(xiàn)配。

四、注意事項(xiàng)

1、血液中的 GSH 幾乎全部存在于紅細(xì)胞內(nèi),可以用每升全血中 GSH 的克數(shù)來表示,也可用

每克 Hb GSH 的含量來表示。

2、計(jì)算時(shí)應(yīng)用消光系數(shù),故比色計(jì)要校正波長(zhǎng)。用標(biāo)準(zhǔn)管計(jì)算較方便、準(zhǔn)確。

3、吸取上清時(shí),最好用帶刻度的 5ml 滴管,或者用移液器,避開表面的一層薄膜,插到上清

液中吸取 2ml 做顯色反應(yīng)。

4、最好每批試驗(yàn)做 2 個(gè)標(biāo)準(zhǔn)管、空白管,以減少操作誤差。

五、測(cè)定意義:

谷-胱甘肽(GSH)是一種低分子清除劑,它可清除 O2 -、H2O2、LOOH。谷-胱甘肽是谷

氨酸、甘-氨酸和半胱-氨酸組成的一種三肽,是組織中主要的非蛋白質(zhì)的巰基化合物,并且是

GSH—PX GST 兩種酶類的底物,為這二種酶分解氫過氧化物所必需,它并且能穩(wěn)定含巰

基的酶和防止血紅蛋白及其它輔因子受氧化損傷,最近還證明 GSH 也參與使維生素 E 恢復(fù)

到還原態(tài)的作用,缺乏或耗竭 GSH 會(huì)促使許多化學(xué)物質(zhì)或環(huán)境因素產(chǎn)生中毒作用或加重其

中毒作用,這可能與增加氧化損傷有關(guān),因而 GSH 的量的多少是衡量機(jī)體抗氧化能力大小

的重要因素。

 谷-胱甘肽(GSH)測(cè)定試劑盒

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