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海藻糖酶實(shí)驗(yàn)代測(cè)

THL催化海藻糖產(chǎn)生葡萄糖，經(jīng)葡萄氧化酶作用生成葡萄糖酸和過(guò)氧化氫，過(guò)氧化物酶催化過(guò)氧化氫跟4-氨基安替比林偶聯(lián)酚反映生成顯色物，在505nm初測(cè)定其吸光度值，反映THL的酶活性。
海藻糖酶一種催化海藻糖水解的酶，在工業(yè)和醫(yī)學(xué)方面有重要作用。
海藻糖酶（trehalase）是葡萄糖苷酶（glucosidase）的一種，對(duì)海藻糖有特異作用，水解后成為2個(gè)分子的葡萄糖，EC3.2.1.28。廣泛存在于細(xì)菌、霉菌、植物和動(dòng)物中。在人，除腎臟、腸、肝臟、膽液和尿以外，在血漿α2-球蛋白部分中，也可檢出其活性，特別是在腎臟中活性很強(qiáng)。
理化特性
海藻糖酶是一種胞外酶，位于哺乳動(dòng)物腎和小腸上皮細(xì)胞膜的刷狀緣，酶學(xué)編號(hào)為EC3.2.1.28，屬于水解酶類，它能催化水解一分子海藻糖生成兩分子葡萄糖，且底物作用是高度專一的。海藻糖酶的等電點(diǎn)為4.37，在正常體液pH7.4時(shí)帶有大量負(fù)電荷。該酶已從哺乳動(dòng)物，腎臟中提純，經(jīng)SDS-PAGE電泳顯示出一個(gè)75kDa的分子帶。海藻糖酶的cDNA已從家兔、人、和鼠組織中分離出來(lái)。人海藻糖酶cDNA完整序列顯示，該酶由583個(gè)氨基酸殘基組成，在氨基端含有一個(gè)由19個(gè)氨基酸殘基組成的典型的可切信號(hào)肽，在羧基端含有5個(gè)潛在的糖基化位點(diǎn)和—個(gè)疏水區(qū)。尿海藻糖酶通過(guò)糖基化磷脂酰肌醇連接于腎小管上皮細(xì)胞膜刷狀緣，需特異的磷脂酶C水解才能將其*從上皮細(xì)胞膜釋放出來(lái)。
生物學(xué)特性
在腸道由海藻糖酶水解海藻糖生成的葡萄糖可能作為能源被吸收利用，有報(bào)道，缺乏海藻糖酶的患者在食了含大量海藻糖的蘑菇后引起腹瀉，而腎海藻糖酶的功能目前還不清楚。有報(bào)道說(shuō)，尿海藻糖酶活性升高與近端腎小管損害和某些種類的腎疾病有關(guān)。

海藻糖酶實(shí)驗(yàn)代測(cè)