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RIPA裂解液(帶PMSF)

  • 型   號(hào):
  • 參考價(jià):1.00~1.00

RIPA裂解液(帶PMSF)RIPA裂解液對(duì)動(dòng)物細(xì)胞胞膜、胞漿、胞核成分有較強(qiáng)裂解作用,是常用的細(xì)胞組織快速裂解液。使用RIPA 裂解液加強(qiáng)型特別適于western blot和大多數(shù)蛋白-蛋白相互作用的實(shí)驗(yàn)等。PMSF能抑制蛋白酶對(duì)蛋白的降解。

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RIPA裂解液(帶PMSF)RIPA主要是從動(dòng)物組織和動(dòng)物細(xì)胞中抽取的可溶性蛋白。

RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一種傳統(tǒng)的細(xì)胞組織快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規(guī)的Western、IP等。RIPA的本意是RadImmunoprecipitation Assay。RIPA裂解液的配方有很多種,根據(jù)其裂解液的強(qiáng)度大致可以分為強(qiáng)、中、弱三類。關(guān)于不同的RIPA裂解液以及我們生物試劑的其它裂解液的主要特點(diǎn)和差異,以及如何選擇裂解液可參考附錄。

 

使用方法

編輯
 
對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞樣品:
1. 融解RIPA裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入PMSF,使PMSF的濃度為1mM。
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞1-2秒后,細(xì)胞就會(huì)被裂解。
對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成50-100萬細(xì)胞/管,然后再裂解。
裂解液用量說明:通常6孔板每孔細(xì)胞加入150微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細(xì)胞密度非常高可以適當(dāng)加大裂解液的用量到200微升或250微升。
         RIPA裂解液(帶PMSF)

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